CD10 (EP195) Anticuerpo monoclonal de Conejo

Formatos Disponibles:

• RMAB037: Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.
• RMPD037: Anticuerpo listo para usar, para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.

Documentación:

• Número de Documento: DS-0051-B
• Fecha Efectiva: 14/02/2018

Inmunógeno:

• Fragmento recombinante que corresponde a los residuos de la proteína CD10 humana.

Características Técnicas:

• Clon: EP195
• Especie: Conejo
• Isotipo: IgG de Conejo
• Diluyente Primario de Anticuerpos: K004

Uso Previsto: Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizados por una persona(s) calificada al evaluar e interpretar los resultados.

Resumen y Explicación: El antígeno común de la leucemia linfoblástica aguda (CALLA/CD10) es una metaloproteinasa transmembrana de tipo II de paso único que divide e inactiva una variedad de factores de crecimiento peptídico importante para la transducción de señales, incluyendo las encefalinas, la bombesina y las sustancias P. CD10 se expresa mediante un número de células hematopoyéticas como células T y B inmaduras, células B de los centros germinales de los folículos linfocitos y granulocitos. También reacciona con una variedad de células no hematopoyéticas, incluidas las células epiteliales del tracto gastrointestinal y el túbulo renal. En el hígado, el canalículo biliar muestra una coloración moderada a fuerte. El CD10 se ha utilizado para la identificación y clasificación de diversos tipos de linfoma maligno. CD10 se expresa en un alto porcentaje de casos de leucemia linfoblástica aguda, linfoma folicular, linfoma de Burkitt, algunos tumores hematopoyéticos y leucemias mielógenas crónicas en crisis de explosión linfática. También se sabe que es un marcador de la célula germinal endometrial. Es útil para diferenciar el sarcoma endometrial (SEE) del leiomioma celular uterino (LLU) y del leiomiosarcoma uterino (LIU).

Formato: Este producto se suministra como un fluido de ascitis. Se utiliza azida sódica como conservante.

Principios de los Procedimientos: La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.

Dilución del Anticuerpo Primario: Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.

Materiales Necesarios, pero no Suministrados: Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ, no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares, están disponibles en Diagnostic BioSystems. Por favor dirigirse a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com.

Almacenamiento y Manipulación: Almacenar a 2-8°C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8°C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas a las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día.

Control de Calidad: Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.

Solución de Problemas: Contacto con el soporte técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o con su Distribuidor local para informar coloración inusual.

Localización Celular: Citoplasma, membrana celular.

Limitaciones del Procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación o de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una contra tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características de Presentación: La dilución optima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos únicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador el determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunción con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.

Parámetros:

• Control positivo: Amígdalas, carcinoma de células renales, linfoma folicular.
• Dilución del concentrado: 1:50 – 1:100.
• El pretratamiento: Citrato Buffer pH 6,0.
• Tiempo de incubación y temperatura: 30 min @ RT.
• Sistema de detección: Sistema de Detección de dos pasos PolyVue™ Plus o Sistema de detección automática Montage PolyVue Plus™ para usar con el Sistema Montage 360.
• Tipo de tejido: FFPE.

Referencias:

1. Shipp MA, et al.: Proc Natl Acad Sci USA 1988, 85: 4819-4823.
2. Shipp MA, et al.: Nature 1990, 347: 394-396.
3. Loke SL, et al.: J Clin Pathol 1990, 43: 654-656.
4. McIntosh GG, et al.: Am J Pathol 1999, 154: 77-82.
5. Thompson RC, et al.: J Biol Chem 2011, 286: 1675-1.