Inmunogen: Células mieloblasticas KG1. Clon: DFT-1 Especie: Ratón Isotipo: IgG1, Kappa Primaria Diluyente Anticuerpo: K004
Concentración y especificaciones del lote disponible bajo petición.
Catálogo # | Descripción
- Mob119: Anticuerpo concentrado para su uso con el Diagnóstico Biosystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos.
- Mob119-05: Anticuerpo listo para usar para su uso con Diagnóstico Biosystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos.
- PDM093: Anticuerpo listo para usar para su uso con el Diagnóstico Biosystems Montage PolyVue™ Plus™ Sistema de Detección Automática y Montage™ Sistema 360.
Uso previsto
Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado a la inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejido normal y neoplásico fijado, incrustadas en parafina, para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de estudios histológicos con los controles adecuados. Los historiales clínicos de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizados por una(s) persona(s) cualificada(s) al elaborar e interpretar los resultados.
Resumen y Explicación
CD43 es una glicoproteína de 51/35/135 kDa (dependiendo del grado de glicolisación), identificada como CD43 Taller IV. El epítopo de Mab DF-T3 es claramente diferente del Mab DF-T4, llamado en la hoja para el I-Ab por T1- T3, 90-100% de linfomas de células T y del 25-75% de los linfomas de células B expresan CD43. No se ha observado reactividad con células B reactivas. Por lo tanto, una población de linaje B que expresa CD43 es muy probable que sea un linfoma maligno, especialmente en un linfoma de linaje B, aunque una población reactiva de células B con CD43 y/o anti-Ig no indicará linfoma a menos en combinación con anti-cuerpo, puede ser utilizado para la diferenciación efectiva de los linfomas en tejidos fijos con formalina. La reactividad endógena puede interferir en la identificación de las células endoteliales dependiendo del sistema usado en combinación. La actividad endógena de la enzima peroxidasa en los tejidos puede llevar a la interpretación de los resultados de inmuno-histoquímica errónea.
Principios de los Procedimientos
La detección de antígenos por inmunohistoquímica (IHC) es un proceso de dos pasos que implica primero, la unión de un anticuerpo primario al antígeno de interés, y en segundo lugar, la detección de anticuerpos enlazados por un cromógeno. El anticuerpo primario se puede utilizar en IHC utilizando técnicas manuales o utilizando diagnóstico Biosystems Automated Montage 360™ Staining System.
Dilución de Antibody primario
Los Biosystems de Diagnóstico listos para usar anticuerpos se han optimizado para su uso en el sistema de detección de Biosystems de diagnóstico recomendado y no requieren más dilución. Dilución adicional puede provocar la pérdida de sensibilidad. El usuario diluye dicho cambio. Los anticuerpos concentrados de Diagnóstico Biosystems deben diluirse de acuerdo con el procedimiento de tinción cuando se utilizan con el sistema de detección Diagnostic Biosystems recomendado. El uso de cualquier método de detección que no sea los sistemas y protocolos recomendados requiere la validación por parte del usuario. Las diluciones de anticuerpos deben ajustarse y verificarse adecuadamente de acuerdo con el ensayo y de detección.
Materiales requeridos pero no proporcionados
Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHC no se proporcionan. Los reactivos de pretratamiento, los sistemas de detección, los reactivos de control y otros reactivos auxiliares están disponibles en Diagnostic Biosystems. Consulte el sitio web de Diagnostic Biosystems en www.dbiosys.com
Almacenamiento y manipulación
Conservar a 2-8oC. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8 oC. No utilice el producto después de la fecha de expiración impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben ser usados inmediatamente. Las soluciones de trabajo no deben ser almacenadas ni utilizadas después de un día de su preparación. La presencia de precipitado o olor unusual indica que el anticuerpo se está deteriorando y no debe utilizarse.
Los controles positivos y negativos deben ejecutarse simultáneamente con todas las muestras de pacientes. Si se observa una tinción inesperada que no puede explicarse por variaciones en los procedimientos de laboratorio y se sospecha un problema con el anticuerpo, póngase en contacto con el Soporte Técnico de Diagnostic Biosystems llamando al (925) 485-3350, escribiendo a techsupport@dbiosys.com o discutiendo los detalles con su distribuidor local.
Colección y preparación de especimenes
Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para su uso antes de la introducción de parafina. Consultar referencias (Kiernan, 1981; Sheehan & Hrapchak, 1980) para más información. Se aconseja al usuario validar el uso de los productos con su tejido pre-preparado y almacenamiento de acuerdo con las recomendaciones de este trabajo.
Precauciones
Este anticuerpo contiene menos de 0,1% de azida sódica. Las concentraciones inferiores al 0,1% no son materiales peligrosos reportables bajo U.S. 29. CFR 1910.1200, OSHA Hazard Communication y CE Directive 91/155/EEC. El azida sódica (NaN3) utilizado como conservante es tóxico si se ingiere. El azida sódica puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar azidas metálicas explosivas (Nady y Moreles, 1983). Si los desagües están siendo utilizados, grandes volúmenes de agua evitar la acumulación de azida en la plomería. Este producto es adecuado para pruebas diagnósticas. Limite la exposición del producto a la piel, membranas mucosas y ropa (Levine et al., 1976). Especímenes, y todo después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellos, deben ser manipulados como si fueran capaces de transmitir la infección y desecharse con las precauciones adecuadas. Nunca pipetee los reactivos por vía oral. Evite el contacto entre la piel y las membranas mucosas con reactivos y muestras. Si los reactivos o especímenes entran en contacto con áreas sensibles, lave con abundantes cantidades de water. La contaminación microbiana de los reactivos puede dar lugar a un aumento de las manchas inespecíficas. Los tiempos de incubación y temperaturas distintas de las especificadas pueden dar resultados erróneos. El usuario debe validar dicho cambio. El MSDS está disponible en request.
Tratamiento de los tejidos antes de la tinción
Coloque las diapositivas en la solución de recuperación de antígenos recomendada mediante Diagnóstico Biosystems Montage Opus™ Antigen Retrieval System. Deje que las diapositivas se enfríen durante 20 minutos antes de la tinción.
Procedimiento de tinción
Refiera la siguiente tabla para las condiciones específicamente recomendadas para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección automatica Detcción automatica de Biosystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos o Sistema de detección automatica de montage PolyVue Plus™ para obtener instrucciones sobre protocolos de tinción específicos o requisitos.
Parámetro | Recomendaciones de Biosystems de Diagnóstico
- Control positivo: Amígdalas
- Dilución concentrada: 1:50-1:100
- Pretratamiento: EDTA Buffer pH 8.0
- Tiempo de incubación & Temperatura: 30 min a RT
- Sistema de detección: PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos o Montage PolyVue Plus™ Sistema de Detección Automatica para el Sistema Montage 360
- Tipo de tejido: FFPE
Control de calidad
Consulte las Normas de Calidad de CLSI para el Diseño e Implementación de Ensayos de Inmuno-histoquímica: Orientación aprobada-Segunda edición (I/LA28-A2) CLSI Wayne, PA USA (www.clsi.org), 2011.
Solución de problemas
Póngase en contacto con el soporte técnico de Diagnostic Biosystems al (925) 484-3350, escribiendo a techsupport@dbiosys.com o discutiendo los detalles con su distribuidor local para información de manchas inusuales.
Localización celular
Membrana celular
Limitaciones del procedimiento
La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica métodos de detección histoquímicos e inmunológicos. El procesamiento y manejo de tejidos antes de la inmunotinción también pueden resultar en resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación e incrustación o la naturaleza inherente del tejido pueden causar reacciones de resultados (Nady y Moreles, 1983). La actividad endógena de peroxidasa o la actividad pseudoperoxidasa en las tes de eritrocitos y la tinción endógena pueden interferir en los resultados dependiendo del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen antígeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) pueden dar un falso positivo con sistemas de peroxidasa basada en placenta (Omata et al, 1980). La contramarcha y el montaje inadecuado pueden comprometer la interpretación de los resultados.
Características del rendimiento
La dilución óptima de anticuerpos y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: fijación, método de recuperación de calor, tiempos de incubación, y espesor de sección de tejido y kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos clínicos, los tiempos de incubación recomendados y los títulos enumerados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y protocolos de la hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnóstico Biosystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden ser utilizados para la interpretación dehallazgos morfológicos junto con otras pruebas diagnósticas y datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.
Referencias:
- Stross WP, et. Revista de Patología Clínica, 1989, 42(9):553-61.
Formatos Disponibles
- Mob119: Anticuerpo concentrado para uso con el sistema de detección automatizado Biosystems Montage 360™.
- Mob119-05: Anticuerpo listo para usar en combinación con el sistema de detección de dos pasos Biosystems PolyVue™ Plus.
- PDM093: Anticuerpo listo para usar para la detección en muestras de tejido embebido en parafina y fijado en formalina.
Este anticuerpo no contiene más de 0.1% de azida sódica como conservante y debe almacenarse entre 2-8 °C. Evite la exposición a la luz directa y manipule con las precauciones adecuadas para evitar contaminación. En caso de problemas técnicos, consulte al soporte de Diagnostic Biosystems para asistencia.
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