PIN5 Cocktail es una mezcla de anticuerpos de conejo anti-p40, anti-citoqueratina (HMW) y anti-p504S (AMACR) específica para la identificación de neoplasia intraepitelial prostática (PIN) en estudios de inmunohistoquímica. Este anticuerpo está disponible en el siguiente formato:
- PDR057: Anticuerpo listo para usar con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.
Fecha de Efectividad: 06/24/2016 Documento: DS-0347-B
Uso previsto Para uso diagnóstico in vitro. (For Outside U.S Market)
Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizadas por una persona calificada al evaluar e interpretar los resultados.
Resumen y explicación La combinación de anticuerpos p504S, p40 y citoqueratina de alto peso molecular (HMW) es particularmente útil para confirmar el diagnóstico de carcinoma prostático en biopsias de núcleos de aguja. El marcador positivo específico de cáncer de próstata, p504S (AMACR), en combinación con los marcadores de células basales negativas (p40 y HMW citoqueratina) ofrece utilidad en el diagnóstico de PIN en casos difíciles donde el tejido puede ser limitado.
Formato Estos anticuerpos han sido previamente titulados y están listos para su uso en ensayos de tinción dual secuencial a dos colores. Las soluciones contienen azida sódica y Proclin 300 como conservantes. Las soluciones son libres de timerosal.
Principios de los procedimientos La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica, primero, la unión de un anticuerpo primario al antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ usando técnicas manuales o mediante el Sistema de Tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.
Procedimiento de tinción Consulte la siguiente tabla para obtener las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección de Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos o Montage PolyVue Plus™ Auto Detection System para obtener orientación sobre los protocolos de tinción específicos u otros requisitos.
| Parámetro | Recomendaciones Diagnostic BioSystems |
|---|---|
| Control positivo | Neoplasia intraepitelial prostática (PIN) |
| Dilución del concentrado | Prediluido |
| El pretratamiento | EDTA Buffer pH 8.0 |
| Tiempo de incubación y temperatura | Reagente A: 15min@RT, Reagente B: 30 min@RT |
| Sistema de Detección | PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos o Montage PolyVue Plus™ Auto Detection System for Montage 360 System |
| Tipo de tejido | FFPE |
Control de calidad Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.
Localización celular
- p40: Nuclear
- Citoqueratina (HMW): Citoplasmática
- p504S (AMACR): Citoplasmática
Limitaciones del procedimiento La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación o de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una contra tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.
Características de presentación La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos únicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador el determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunción con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo calificado.
Referencias
- Beach et al. Am J Surg Pathol 26 (12): 1588, 2002.
- Luo et al. Cancer Res 62 (8): 2220, 2002.
- Molina et al. Mod Pathol 17: 1180, 2004.
- Tacha and Miller Appl Immunohistochem Mol Morphol 12 (1): 75, 2004.
- Signoretti et al. Am J Pathol 157 (6): 1769.
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