Thyroid Transcription Factor-1, TTF-1, Thyroid and Lung Epithelial Marker – Anticuerpo monoclonal de Ratón, Mob285, Mob285-05, PDM104, PDM1104-10MM. Documento: DS-0396-A. Fecha efectiva: 12/01/2014.
Inmunógeno: A los ratones BALB/C se les inyectó una proteína de rata recombinante. Clone: 8G7G3/1. Especie: Ratón. Isotipo: IgG1, Kappa. Diluyente Primario de Anticuerpos: K004. La concentración de la especificidad de lote disponible a petición.
Catálogo: Mob285. Descripción: 1 ml Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos. Catálogo: Mob285-05. Descripción: 0.5 ml Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos. Catálogo: PDM104. Descripción: 6 ml Anticuerpo listo para usar, para uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos. Catálogo: PDM1104-10MM. Descripción: Anticuerpo con código de barras de 10 ml listo para usar con Diagnostic BioSystems Montage PolyVue Plus™ Sistema de Auto Detección & Montage™ Sistema 360 / HighLighter.
Uso previsto: Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizadas por una persona(s) calificada al evaluar e interpretar los resultados.
Resumen y explicación: Este anticuerpo se dirige a una proteína de 40 kDa, que se identifica como el factor de transcripción de la tiroides (TTF-1). El TTF-1 se expresa en las células epiteliales de la glándula tiroides y el pulmón. El TTF-1 tiñe el adenocarcinoma primario de pulmón y el carcinoma de células pequeñas, pero no tiñe el carcinoma de colon y de mama.
Formato: Este producto se suministra como un sobrenadante de cultivo de tejidos y contiene azida sódica como conservante.
Principios de los procedimientos: La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de Tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.
Dilución del anticuerpo primario: Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.
Los anticuerpos concentrados de Diagnostic BioSystems, deben diluirse de acuerdo con el procedimiento de tinción, cuando se utilizan con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado. El uso de cualquiera de los métodos de detección distintos a los sistemas y protocolos recomendados requiere validación por el usuario. Las diluciones de anticuerpos deben ajustarse apropiadamente y verificarse de acuerdo con el sistema de detección utilizado.
Materiales necesarios, pero no suministrados: Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ, no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares, están disponibles en Diagnostic BioSystems. Para más información, diríjase a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com.
Almacenamiento y manipulación: Almacenar a 2-8°C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad indicada almacenando a 2-8°C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas, deben ser verificados para el uso. Los reactivos diluidos deben utilizarse en pronto. Las porciones no utilizadas de los reactivos diluidos deben ser desechadas después de un día. La presencia de precipitado u olor insual indica que el anticuerpo se deterioro y no se debe utilizar.
Los controles positivos y negativos se deben ejecutar simultáneamente con todas las muestras de pacientes. Si se observa una tinción inesperada que no puede explicarse por las variaciones en los procedimientos de laboratorio o si sospecha un problema con el anticuerpo, póngase en contacto con Soporte Técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2 o techsupport@dbiosys.com.
Recogida y preparación de muestras: Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para uso antes de la incrustación en parafina. Consulte las referencias (Kiernan, 1981: Sheehan & Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras. Se recomienda al usuario validar el uso de todos los productos con sus muestras de tejido propio y manejados de acuerdo con sus prácticas de laboratorio.
Precauciones: Este anticuerpo contiene menos del 0.1% de azida sódica. Las concentraciones de menos de 0.1% no son materiales peligrosos notificados según US 29 CFR 1910.1200, OSHA de Comunicación de Riesgos y la Directiva 91/155 / CE. El azida de sodio (NaN3) usado como un conservante es tóxico si se ingiere. El azida de sodio puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar metales metálicos altamente explosivos. Este riesgo puede ser reducido diluyendo los residuos con grandes cantidades de agua para lavar la aducción de azida a las cañerías. (Centro para el Control de Enfermedades, 1976, Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional 1976). Las muestras, antes y después de la fijación, materiales potencialmente expuestos a ellos, deben ser manejados como de riesgo. Se recomienda utilizar batas y guantes para desechar en contenedores de desechos. Manejar con cuidado para evitar contacto con la piel y las membranas mucosas con las manos no revisadas. Si los reactivos entran en contacto con la piel, lavar con grandes cantidades de agua. La contaminación microbiana de los reactivos puede resultar en un aumento de la no reactividad, la tinción de fondo y la pérdida de especificidad de los anticuerpos puede dar resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio. El MSDS está disponible a petición.
El tratamiento de los tejidos antes de la tinción: Coloque los portaobjetos en la solución de recuperación de antígeno recomendado usando el Sistema de recuperación de antígeno de Diagnostic BioSystems, Montage Opus™. Permitir enfriar las laminillas durante 20 minutos antes de la tinción.
Procedimiento de tinción: Consulte la siguiente tabla para obtener las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección de Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus de dos pasos, o Sistema de Detección de Montage PolyVue™ Plus ™ Auto para obtener protocolos de tinción específicos u otros requisitos.
Parámetro: Control positivo. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: Pulmón. Parámetro: Dilución del concentrado. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: 1:25 – 1:50. Parámetro: El pretratamiento. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: EDTA Buffer pH 8,0. Parámetro: Tiempo de incubación y temperatura. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: 30 min @ RT. Parámetro: Sistema de Detección. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: Sistema de Detección de dos pasos PolyVue™ Plus o Sistema de detección automática Diagnostic BioSystems Montage PolyVue Plus™ para usar con el Sistema de Auto Detección & Montage™ Sistema 360 / HighLighter. Parámetro: Tipo de tejido. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: FFPE.
Control de calidad: Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta para Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU.
Para más información: Contacte con el soporte técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o su Distribuidor local para obtener ayuda técnica.
Localización celular: Nuclear
Limitaciones del procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la inclusión o de la naturaleza del antígeno (tissue histology) pueden alterar los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función de la naturaleza del antígeno. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una contra tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.
Características de presentación: La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación del calor, los tiempos de incubación, el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos únicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador el determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunto con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.
Referencias: i) Holzinger et al. Hybridoma 15: 49, 1996.
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